А как тут плюсы ставить я Доку хочу плюс поставить за интересную мне тему?
Тем более, я подписался на эту хрень, которая будет мне полезна, поскольку я делать как раз начинаю супер-пупер-нано биочип. О чем тут расскажу.
Они иммобилизуют на наночастицы серебра антитела на разные вирусы, частицы разного размера, с а размер и определяет их окраску их коллоидных растворов. Для эболовирусов они определяют как раз антитела к GP.
AgNPs were prepared for lateral flow chromatography by conjugating antibodies to the NPs. Combining antibodies with AgNP in solution results in antibody binding to the AgNP mainly by electrostatic adsorption. Antibodies recognizing dengue virus (DENV) NS1 protein, Yellow Fever Virus (YFV) NS1 protein, and Ebola virus, Zaire strain (ZEBOV) gly-coprotein GP were used. Ebola belongs to the Filoviridae virus family, while DENV and YFV are members of the Flaviviridae family. Our goal was to demonstrate detection without cross-contamination. We identified and characterized pairs of monoclonal antibodies directed against DENV NS1 (antibodies F4.24 and 8H7.G10, generated in our laboratory), YFV NS1 (antibody 9NS1, provided by Dr, Michael Diamond)14 as well as ZEBOV glycoprotein (GP) (anti-ZEBOV antibodies, IBT Bioservices). Orange AgNPs, red AgNPs, and green AgNPs were conjugated with anti-YFV NS1 monoclonal antibody (mAb), anti-ZEBOV GP mAb, or anti-DENV NS1 mAb, respectively. After conjugation, AgNP surfaces were backfilled with thiolated PEG (mPEG-SH, MW = 5000) to enhance conjugate stability. Upon conjugation, the mean hydrodynamic size increased by ~50 nm (Fig. 1h), and the negative charge decreased (Fig. 1i), suggesting successful functionalization of the AgNPs with the antibodies.
Но они ничего не пишут толком про иммобилизацию
binding to the AgNP mainly by electrostatic adsorption
Просто абсорбции там может быть и недостаточно. Или надо наносить подслой или же в этих антителах цистеин или иная сера. Потом серебро может блокировать и активный центр антитела. Это надо глянуть в PDB что за антитела. Но самое главное не в этом. Слой антител на этих треугольных частицах может сильно изменить оптические свойства наночастиц. И окраска коллоидов со слоем антител, не факт что сохранится. Скорее там всё тупо серым станет. Хотя может быть и нет.
Вот также касательно плазмы/сыворотки.
Во-первых, ЭДТА туда никак нельзя всё серебро на хрен, даже если оно там чем-то покрыто, растворится в комплекс с ЭДТА. Во-вторых там столько всякой хрени, которая может mainly by electrostatic adsorption поналипать на эти их наночастицы, сверху антител.
Я например. работал с наночастицами серебра около 5 нм на порядок меньше ихних. Но они были не в коллоидном виде, а допировали мезопористую двуокись титана, Вот к ним липли у меня всякие гидролазы цистеином, иммобилизовывались. а потом я ещё выдерживал этм структуры в растворе цистеина. Чтобы не осталось свободного места, чтобы всё залепил цистеин. Иначе бы там у меня mainly by electrostatic adsorption наприлипало бы всякой хрени и вся система бы тупо засралась.
В общем-то не случайно биохимики боятся серебра как вампиры.
Имхо то что там они написали может работать, но при соблюдении такой кучи условий, о которых там нет ни слова. Более смахивает на нанофреническую научную фантастику.
Отредактировано Эрик (2015-03-06 13:56:09)
